2024年5月6日发(作者：壬昊宇)
胞外淀粉酶产生菌的分离
1材料与仪器
1.1 材料
1.1.1土样
采自………
1.1.2 培养基
淀粉培养基：蛋白胨，10g；NaCL，5g；牛肉膏，5g；可溶性淀粉，2g；蒸
馏水，1000mL；琼脂，15～20g。
1.1.3 试剂
淀粉水解试验用碘液（卢戈氏碘液）：碘片，1g；碘化钾，2g；蒸馏水，300mL。
1.2 仪器
JT201N电子天平，上海精天电子仪器有限公司；
HD650型桌上洁净工作台，苏州净化设备有限公司；
TP-S2027D智能蒸汽灭菌器，长春市百奥生物仪器有限责任公司；
可调式移液器 ，上海雷勃分析仪器有限公司；
KDM-500ML可调控温电热套，
山东
鄄城新天地实验仪器设备厂；
DRH-100电热恒温箱，广东省环境保护仪器设备厂；
C21A01-13苏泊尔电磁炉，浙江苏泊尔股份有限公司。
2试验方法
2.1 制备土壤稀释液
取5g土壤样品溶于盛有45mL无菌水中充分混匀后，取1mL土壤悬液加入盛
有9mL无菌水的试管中混匀，此为10
-2
稀释液,依此类推,制成10
-3
～10
-6
不同稀释度
的土壤溶液。
2.2 菌株分离
分别取10
-2
～10
-6
浓度的稀释液各100uL涂布于淀粉培养基中，倒置于37℃恒
温培养箱中培养24~48h。待长出单菌落后，往平板表面喷加卢戈氏碘液，菌落
周围出现透明圈的即为胞外淀粉酶产生菌。
2.3 菌株纯化
将有透明圈的单菌落分别划线接种于淀粉培养基中进行进一步纯化，直至获得纯培养。
3 实验结果
3.1 平板分离结果
采集土样稀释涂布于淀粉培养基，37℃恒温培养24h，在……稀释度平板上
形成大量单菌落，根据菌落特征初步判断获得……种细菌，分别编号，结果见表
1。
表1 平板分离结果
菌株
1号
2号
3号
4号
……..
菌落特征
3.2 产酶菌株的鉴别
往……稀释度平板表面喷加稀碘液，……..号菌落周围呈现透明水解圈，表明
这….个菌株均为胞外淀粉酶产生菌株。分别挑取后进行平板划线，直至获得纯
培养。
4 结论与讨论
说明通过什么方法获得几株产酶菌株。实验中的不足及经验。
2024年5月6日发(作者：壬昊宇)
胞外淀粉酶产生菌的分离
1材料与仪器
1.1 材料
1.1.1土样
采自………
1.1.2 培养基
淀粉培养基：蛋白胨，10g；NaCL，5g；牛肉膏，5g；可溶性淀粉，2g；蒸
馏水，1000mL；琼脂，15～20g。
1.1.3 试剂
淀粉水解试验用碘液（卢戈氏碘液）：碘片，1g；碘化钾，2g；蒸馏水，300mL。
1.2 仪器
JT201N电子天平，上海精天电子仪器有限公司；
HD650型桌上洁净工作台，苏州净化设备有限公司；
TP-S2027D智能蒸汽灭菌器，长春市百奥生物仪器有限责任公司；
可调式移液器 ，上海雷勃分析仪器有限公司；
KDM-500ML可调控温电热套，
山东
鄄城新天地实验仪器设备厂；
DRH-100电热恒温箱，广东省环境保护仪器设备厂；
C21A01-13苏泊尔电磁炉，浙江苏泊尔股份有限公司。
2试验方法
2.1 制备土壤稀释液
取5g土壤样品溶于盛有45mL无菌水中充分混匀后，取1mL土壤悬液加入盛
有9mL无菌水的试管中混匀，此为10
-2
稀释液,依此类推,制成10
-3
～10
-6
不同稀释度
的土壤溶液。
2.2 菌株分离
分别取10
-2
～10
-6
浓度的稀释液各100uL涂布于淀粉培养基中，倒置于37℃恒
温培养箱中培养24~48h。待长出单菌落后，往平板表面喷加卢戈氏碘液，菌落
周围出现透明圈的即为胞外淀粉酶产生菌。
2.3 菌株纯化
将有透明圈的单菌落分别划线接种于淀粉培养基中进行进一步纯化，直至获得纯培养。
3 实验结果
3.1 平板分离结果
采集土样稀释涂布于淀粉培养基，37℃恒温培养24h，在……稀释度平板上
形成大量单菌落，根据菌落特征初步判断获得……种细菌，分别编号，结果见表
1。
表1 平板分离结果
菌株
1号
2号
3号
4号
……..
菌落特征
3.2 产酶菌株的鉴别
往……稀释度平板表面喷加稀碘液，……..号菌落周围呈现透明水解圈，表明
这….个菌株均为胞外淀粉酶产生菌株。分别挑取后进行平板划线，直至获得纯
培养。
4 结论与讨论
说明通过什么方法获得几株产酶菌株。实验中的不足及经验。